链霉亲和素SA
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产品名称 : 链霉亲和素SA
编 号 : YAB002-1mg
品 牌 :
Yobios
别 名 :
Streptavidin,SA;Streptavidin,SA
规 格 :1mg
描 述 :纯度≥99%,活性≥18u/mg
存 储 :F
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链霉亲和素(Streptavidin,SA)是源自于阿维丁链霉菌(Streptomyces avidinii)的蛋白质,由四个相同的亚基组成,每个亚基可结合一个生物素分子,故一个链霉亲和素分子可结合四个生物素分子。链霉亲和素与生物素具有极强的亲和力,其解离常数约为10-15 M。这一特质使得链霉亲和素-生物素系统作为一种信号放大机制广泛应用于荧光显微镜术、流式细胞分析、免疫组化、Western杂交、ELISA检测等传统生物学技术,以及生物芯片和纳米生物学等现代前沿研究领域。与来源于鸡蛋清的亲和素(Avidin)相比,链霉亲和素不含糖基修饰,等电点接近生理pH值,因而非特异性吸附显著低于前者,可提供更高的检测信噪比。
本公司提供两种链霉亲和素产品(编号分别为YAB001和YAB002),均为不含天然链霉亲和素N-末端及C-末端多肽片段的重组核心链霉亲合素。去除N-末端和C-末端多肽不仅可增强链霉亲和素的溶解度,减少聚集体的形成,还可避免其对生物素的结合形成空间位阻。YAB001和YAB002的区别在于,前者在核心链霉亲合素的C-末端上添加了His6组氨酸标签,用户可据此设计基于Ni-NTA或Ni-IDA的实验方案,尤其是可在Ni-NTA表面上定向组装链霉亲和素,避免非特异性吸附造成的活性损失和表面性质的不均一性;而YAB002不含任何标签,具有分子量更小、比活性更高的优点。YAB001和YAB002的一些理化特性比较见下表。
分子量(kD) | 理论等电点1 | 比活性(U/mg)2 | |
YAB001 | 57.8 | 6.46 | 16.9 |
YAB002 | 52.3 | 6.09 | 18.7 |
1 Calculated with ExPASy online tool Compute pI/Mw.
2 One unit is defined as the amount of streptavidin that binds 1 μg biotin.
本公司生产的链霉亲和素具有纯度高、活性高的突出优点。SDS-PAGE检测时,即使过量上样也几乎检测不到杂蛋白的存在(见上图)。YAB001和YAB002的出厂质量标准为:纯度>=99%,而活性分别>=16 U/mg和18 U/mg,接近各自的理论最大值。
链霉亲合素(YAB002)产品说明
链霉亲和素(streptavidin)是一种源自于阿维丁链霉菌(Streptomyces avidinii)的蛋白质,由四个相同的亚基组成,每个亚基可结合一个生物素分子。链霉亲和素与生物素的结合力极强,其解离常数约为10-14 M,这一特质使得链霉亲和素-生物素系统广泛应用于荧光显微镜术、免疫电镜、流式细胞分析、Western杂交、ELISA检测等传统生物学技术,以及生物芯片和纳米生物学等现代前沿研究领域。与来源于鸡蛋清的亲和素相比,链霉亲和素不含糖基修饰,等电点接近生理pH值,因而非特异性吸附显著低于前者,可提供更高的检测信噪比。
本公司生产的链霉亲和素(编号:AB002)是经基因工程改造的重组核心链霉亲和素,不含天然链霉亲和素N-末端及C-末端多肽片段,有效避免了这些末端多肽对生物素结合的空间位阻。 其分子量为52.3kD,理论活性为18.7 Units/mg。1 unit定义为结合1 µg生物素所需链霉亲和素的量(单位mg)。
编 号:YAB002-1,YAB002-5,YAB002-10,YAB002-100
规 格:1毫克,5毫克,10毫克,100毫克
性 状:冻干粉,含微量磷酸盐
产品来源:重组蛋白,大肠杆菌表达
分 子 量: 52.3 kD
消光系数:1 mg/ml浓度时,280nm光吸收A280=3.2 [1]。
纯 度: SDS-PAGE检测³99%。
活 性:³18 Units/mg(生物素滴定法[2]测定)。
保存条件: -20°C干燥保存,活性至少保持2年。
溶解方法:以纯水溶解冻干粉至5-10 mg/ml浓度,分装成适宜体积,-20°C 或-80°C冻存。避免反复冻溶,其活性至少可保持半年。如欲在4°C下保存溶液,可添加适量杀菌剂(如0.05%叠氮钠)以避免微生物生长,并尽快用完。链霉亲和素在高浓度时、冻干过程中或反复冻溶条件下易形成难溶的聚集体,如见溶液略呈浑浊,可经16000 g离心5分钟去除不溶物。不溶物含量很少,不影响产品有效成分的含量及使用。
定量方法:链霉亲和素是一种高度稳定的蛋白质,可抵抗蛋白酶消化、极端pH和温度、以及较高浓度的变性剂和去污剂。相应的,以常用蛋白质浓度测定方法如Lowry法、Bradford法和Biuret法等测定链霉亲和素浓度时,所得结果通常显著低于其真实浓度。推荐采用280 nm光吸收值测定其浓度。
参考文献:
1. Suter M. et al., Isolation and Characterization of Highly Purified Streptavidin Obtained in a Two-step Purification Procedure from Streptomyces avidinii Grown in a Synthetic Medium. J. Immunol. Meth. 1988, 113: 83-91
2. Green N.M. Spectroscopic Evidence for the Participation of Tryptophan Residues in the Binding of Biotin by Avidin. Biochim. Biophys. Acta, 1962, 59: 244-246
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